Russian Journal of BiotherapyRussian Journal of BiotherapyРоссийский биотерапевтический журнал1726-97841726-9792Publishing House ABV Press3010.17650/1726-9784-2015-14-3-29-36ОРГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИPRODUCTION OF PURIFIED HUMAN RECOMBINANT ANTIGEN PRAME AND SPECIFIC MONOCLONAL ANTIBODIESПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО РАКОВО-ТЕСТИКУЛЯРНОГО БЕЛКА PRAME И МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ К НЕМУFinashutinaYu. P.ФинашутинаЮлия Павловна
Russian Federation
j_finashutina@mail.ruMisyurinA. V.МисюринА. В.
Russian Federation
AkhlyninaT. V.АхлынинаТ. В.
Russian Federation
LyzhkoN. A.ЛыжкоН. А.
Russian Federation
KrutovA. A.КрутовА. А.
Russian Federation
AksenovaE. V.АксеноваЕ. В.
Russian Federation
MisyurinV. A.МисюринВ. А.
Russian Federation
BaryshnikovA. Yu.БарышниковА. Ю.
Russian Federation
FSBI «N.N. Blokhin RCRC»ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» МЗ РФ«GeneTechnology» LLCООО «ГеноТехнология»30092015143293610042018https://bioterapevt.abvpress.ru/jour/article/view/30

Tumor antigens recognized by CTLs have been identified several years ago and are major targets for creating anticancer vaccines. PRAME is an antigen which is highly expressed in various malignant tumors including melanomas and hematopoietic malignancies such as acute and chronic leukemias (AML, CML). Technology for producing recombinant antigen PRAME is based on creating a bacterial producer strain containing cDNA of human PRAME gene. We have obtained two producers of recombinant PRAME protein and its N-half, the synthesis of the target protein in the producers occurs in the inclusion bodies. The schemes of isolation and purification of soluble proteins have been developed. The protein purity was approximately 95-96%. The monoclonal antibodies raised against truncated recombinant PRAME were used for PRAME protein analysis by Western blot on the various tumor cells. Specific monoclonal antibodies recognized the native PRAME protein in tumor cell lines as well as in tumor samples from patients. Our findings support the suggestion that this recombinant antigen may be further used as a target for diagnostic and therapeutic approaches. The monoclonal antibodies can be used for immunoassays of tumor samples from patients with hematologic malignancies to reveal clinical features and to monitor tumor progression.

рекомбинантный антигенPRAMEаффинная хроматографиярефолдингмоноклональные антителаrecombinant PRAME antigenaffine chromatographyrefoldingmonoclonal antibodiesАбраменко И.В., Белоус Н.И., Крячок И.А. и др. Экспрессия гена PRAME при миеломной болезни // Терапевтический архив. - 2004. - T. 76, № 7. - С. 77-81.Афанасьева Д.А., Барышникова М.А., Соколова З.А., Косоруков В.С. Разработка липосомальной конструкции, содержащей лизат опухолевых клеток // Российский биотерапевтический журнал. - 2013. -Т. 12, № 2. - С. 5.Афанасьева Д.А., Барышникова М.А., Щербаков А.И. и др. Разработка модели противоопухолевой липосомальной вакцины // Иммунология. - 2014. - № 6. - 317-21.Барышников А.Ю. Взаимодействие опухоли и иммунной системы организма // Практическая онкология. - 2003. - Т. 4, № 3. - С. 127-30.Барышников А.Ю. Принципы и практика вакцинотерапии рака // Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2004. - № 2. - С. 59-63.Барышников А.Ю., Демидов Л.В., Кадагидзе З.Г. и др. Современные проблемы биотерапии злокачественных опухолей // Вестник Московского онкологического общества. - 2008. - №. 1. - С. 6--10.Барышников А.Ю., Демидов Л.В., Михайлова И.Н., Петенко Н.Н. Вакцинотерапия рака: от эксперимента к клинике // Вестник Московского Онкологического Общества. - 2007. - № 10. - С. 46-8.Барышникова М.А., Барышников А.Ю. Молекулярные механизмы преодоления множественной лекарственной устойчивости липосомальными противоопухолевыми препаратами // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14, № 1. - С. 3-10.Гапонова Т.В., Менделеева Л.П., Мисюрин А.В. и др. Экспрессия опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 и XIAP у больных множественной миеломой // Онкогематология. - 2009. - № 2. - С. 52-7.Мисюрин А.В., Абраменко И.В., Белоус Н.И. и др. Экспрессия гена PRAME при множественной миеломе // Онкология. - 2004. - Т. 2. - С. 90-4.Мисюрин В.А. Аутосомные раково-тестикулярные гены // Российский биотерапевтический журнал. -2014. - Т. 13, № 3. - С. 77-82.Мисюрин В.А. Х-хромосомные раково-тестикулярные гены // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, № 2. - С. 3-10.Мисюрин В.А., Лукина А.Е., Кесаева Л.А. и др. Различия в частоте развития рецидива острого промиелоцитарного лейкоза в зависимости от уровня экспрессии PRAME // Гематология и трансфузиология. - 2014. - Т. 59, № S1. - С. 51.Мисюрин В.А., Лукина А.Е., Мисюрин А.В. и др. Особенности соотношения уровней экспрессии генов PRAME и PML/RARA в дебюте острого промиелоцитарного лейкоза // Российский биотерапевтический журнал. - 2014. - Т. 13, № 1. - С. 9-16.Мисюрин В.А., Мисюрин А.В., Кесаева Л.А. и др. Изменение профиля экспрессии канцер-тестис антигенов в крови при прогрессии хронического миелоидного лейкоза // Гематология и трансфузиология. - 2014. - Т. 59, № S1. - С. 52.Мисюрин В.А., Мисюрин А.В., Кесаева Л.А. и др. Новые маркеры прогрессирования хронического миелолейкоза // Клиническая онкогематология. - 2014. - Т. 7, № 2. - С. 206-12.Мисюрин В.А., Мисюрин А.В., Кесаева Л.А. и др. Сходство профилей экспрессии раково-тестикулярных генов при хронических миелопролиферативных заболеваниях и хроническом миелоидном лейкозе // Гематология и трансфузиология. - 2014. - Т. 59, № S1. - С. 51-2.Мисюрин В.А., Мисюрин А.В., Лукина А.Е. и др. Профили экспрессии раково-тестикулярных генов в клеточных линиях меланомы // Биологические мембраны: Журнал мембранной и клеточной биологии. - 2014. - Т. 31, № 2. - С. 104-9.Михайлова Т.В, Барышникова М.А., Клименко О.В. и др. Разработка липосомальной формы противоопухолевой вакцины // Российский биотерапевтический журнал. - 2011. - Т. 10, № 4. - С. 62-6.Никитин К.Д., Барышников А.Ю. Противоопухолевые вакцины на основе белков теплового шока // Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - Т. 6, № 2. - С. 3-12.Новиков В.В., Евсегнеева И.В., Караулов А.В., Барышников А.Ю. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы при социально значимых инфекциях // Российский биотерапевтический журнал. - 2005. - Т. 4, № 2. - С. 100-5.Новиков В.В., Караулов А.В., Барышников А.Ю. и др. Особенности структурного состояния пула растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы // Молекулярная медицина. - 2009. - № 4. - С. 27-33.Aksenova E., Krutov A., Misiurin A. et al. Correlation between PRAME., WT1 and BCR-ABL expression and response to the therapy at CML // Haematologica. - 2010. - 95(S2). - P. 529.Babiak A., Steinhauser M., Götz M. et al. Frequent T-cell responses against immunogenic targets in lung cancer patients for targeted immunotherapy // Oncol Rep. - 2014. - 31(1). - P. 384-90.Bocchia M., Bronte V., Colombo M.P. Antitumor vaccination: where we stand // Haematologica. - 2000. -85(11). - P. 1172-206.Brenne K., Nymoen D.A., Reich R. PRAME (preferentially expressed antigen of melanoma) is a novel marker for differentiating serous carcinoma from malignant mesothelioma // Am J Clin Pathol. - 2012. -137(2). - P. 240-7.Epping M.T., Hart A.A., Glas A.M. et al. PRAME expression and clinical outcome of breast cancer // Br J Cancer. - 2008. - 99. - P. 398-403.Epping M.T., Wang L., Edel M.J. et al. The human tumor antigen PRAME is a dominant repressor of retinoic acid receptor signaling // Cell. - 2005. - 122. - P. 835-47.Finashutina Y., Akhlynina T., Zhelnova E. et al. Anti-tumor vaccination in combination with modified donor lymphocyte infusion for an AML resistant patient with early extramedullar relapses // Haematologica. -2013. - 98(1). - P. 517-8.Finashutina Yu.P., Aksenova E. V., Misyurin A. V. et al. PRAME expression in chronic myeloid leukemia // Haematologica. - 2007. - 92(1). - P. 376.Galfrè G., Milstein C. Preparation of monoclonal antibodies: strategies and procedures // Methods Enzymol. - 1981. - 73. - P. 3-46.Gaponova T., Mendeleeva L.P., Misurin A. et al. Expression of tumor-associated genes in multiple myeloma patients during high-dose chemotherapy and auto-SCT // Cellular Therapy and Transplantation. - 2009. -2(5). - P. 62-3.Ikeda H., Lethe B., Lehmann F. et al. Characterization of an antigen that is recognized on a melanoma showing partial HLA loss by CTL expressing an NK inhibitory receptor // Immunity. - 1997. - 6. - P. 199-208.Kruit W.H., van Ojik H.H., Brichard V.G. et al. Phase 1/2 study of subcutaneous and intradermal immunization with a recombinant MAGE-3 protein in patients with detectable metastatic melanoma // Int J Cancer. -2005. - 117(4). - P. 596-604.Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. -1970. - 224. - P. 680-5.Luetkens T., Schafhausen P., Uhlich F. et al. Expression, epigenetic regulation, and humoral immunogenicity of cancer-testis antigens in chronic myeloid leukemia // Leukemia Research. - 2010. - 34. - P. 1647-55.Lyzhko N.A., Akhlynina T. V., Misiurin A.V. et al. Expression and localization of the PRAME protein in the different cell cultures // 17th EHA Congress. - 2012. - Abstract 1356.Misurin A., Gaponova T., Mendeleeva L. et al. Expression of PRAME and WT1 in multiple myeloma patients during high dose chemotherapy and auto-SCT // Blood. - 2008. - 112(11). - P. 5128.Oberthuer A., Hero B., Spitz R. et al. The tumor-associated antigen PRAME is universally expressed in high-stage neuroblastoma and associated with poor outcome // Clin Cancer Res. - 2004. - 10. - P. 4307-13.Okuyama R., Aruga A., Hatori T. et al. Immunological responses to a multi-peptide vaccine targeting cancer-testis antigens and VEGFRs in advanced pancreatic cancer patients // Oncoimmunology. - 2013. -2(11). - e27010.Proto-Siqueira R., Figueiredo-Pontes L.L., Panepucci R.A. et al. PRAME is a membrane and cytoplasmic protein aberrantly expressed in chronic lymphocytic leukemia and mantle cell lymphoma // Leukaemia Res. - 2006. - 30. - P. 1333-9.Quintarelli C., Dotti G., De Angelis B. et al. Cytotoxic T lymphocytes directed to the preferentially expressed antigen of melanoma (PRAME) target chronic myeloid leukemia // Blood. - 2008. - 112. - P. 1876-85.Rezvani K., Yong A.S., Tawab A. et al. Ex vivo characterization of polyclonal memory CD8+ T-cell responses to PRAME-specific peptides in patients with acute lymphoblastic leukemia and acute and chronic myeloid leukemia // Blood. - 2009. - 113. - P. 2245-55.Steinbach D., Hermann J., Viehmann S. et al. Clinical implications of PRAME gene expression in childhood acute myeloid leukemia // Cancer Genet Cytogenet. - 2002. - 133. - P. 118-23.Tabarkiewicz J., Giannopoulos K. Definition of a target for immunotherapy and results of the first Peptide vaccination study in chronic lymphocytic leukemia // Transplant Proc. - 2010. - 42(8). - P. 3293-6.Tajeddine N., Gala J.L., Louis M. et al. Tumor-associated antigen preferentially expressed antigen of melanoma (PRAME) induces caspase-independent cell death in vitro and reduces tumorigenicity in vivo // Cancer Res. - 2005. - 65. - P. 7348-55.Vansteenkiste J., Zielinski M., Linder A. et al. Final results of a multi-center, double-blind, randomized, placebo-controlled phase II study to assess the efficacy of MAGE-A3 immunotherapeutic as adjuvant therapy in stage IB/II non-small cell lung cancer (NSCLC) // J Clin Oncol. - 2007. - 25(18S). - P. 7554.Weber J.S., Vogelzang N.J., Ernstoff M.S. et al. A phase 1 study of a vaccine targeting preferentially expressed antigen in melanoma and prostate-specific membrane antigen in patients with advanced solid tumors // J Immunother. - 2011. - 34(7). - P. 556-67.