Russian Journal of BiotherapyRussian Journal of BiotherapyРоссийский биотерапевтический журнал1726-97841726-9792Publishing House ABV Press162710.17650/1726-9784-2026-25-2-89-102ORIGINAL REPORTSОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticleInstrumental methods in analytical studies of indolocarbazole derivatives with antitumor activityИнструментальные методы анализа производных индолокарбазола, обладающих противоопухолевой активностьюhttps://orcid.org/0000-0002-9200-4492IgnatevaElena V.ИгнатьеваЕлена Владимировна
Russian Federation
chem_pharm@ronc.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8818-7812YartsevaIrina V.ЯрцеваИ. В.
Russian Federation
chem_pharm@ronc.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1125-1932KozinDmitry A.КозинД. А.
Russian Federation
chem_pharm@ronc.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0218-8265GusevDmitriy V.ГусевД. В.
Russian Federation
chem_pharm@ronc.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3987-6072EktovaLydia V.ЭктоваЛ. В.
Russian Federation
chem_pharm@ronc.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3034-750XShprakhZoya S.ШпрахЗ. С.
Russian Federation
chem_pharm@ronc.ruN. N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology, Ministry of Health of RussiaФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н. Н. Блохина» Минздрава России15072026252891021807202618072026Copyright ©; 2026, ABV-PressCopyright ©; 2026, АБВ-пресс2026ABV-PressАБВ-прессhttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0/https://bioterapevt.abvpress.ru/jour/article/view/1627

Background. The development of innovative national antitumor drugs remains an ultimately important task. Among the new drugs, which selectively affect tumors, indolo [2,3-a] carbazole – N-glycosides LCS-1208 and LCS-1269, synthesized using an original technique at the Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian Federation, are of essential interest. The paper presents possible options of instrumental analytical methods for identification of differences in the physical chemical features of structurally similar compounds LCS-1208 and LC S-1269. These methods may be used for establishing experimentally justified standards of quality for the standardization of the compounds as pharmaceutical substances.

Aim. To study the physical chemical features and to develop methods for the qualitative and quantitative analysis of LCS-1208 and LCS-1269.

Materials and methods. The study involved modern instrumental methods of analysis, such as polarimetry, ultraviolet spectroscopy, infrared spectroscopy, proton magnetic resonance spectroscopy spectroscopy, high performance liquid chromatography (HPLC), and HPLC with the tandem mass spectrometric detection (HPLC–MS / MS).

Results. Significant differences in the physical chemical features of the original N-glycosides LCS-1208 and LCS-1269 were determined using modern instrumental analytical methods.

The authors present the results verifying the structure of each of these compounds. The methods for qualitative and quantitative analysis of these compounds were developed in the study. The HPLC validation was performed for the LCS-1269 quantification method. The study showed the compliance of the obtained validation characteristics with the criteria approved by the Russian State Pharmacopoeia XV Ed and Pharmacopoeia of the Eurasian Economic Union. The authors determined the structure of impurities in LCS-1269 samples and proposed a method for their quantitative determination.

Conclusion. Structures of indolo [2,3-a] carbazole derivatives LCS-1208 and LCS-1269 were confirmed and shown to be reliably distinguishable. Impurity structures from the final LHS-1269 synthesis step were identified. HPLC methods for quantifying LCS-1208 and LCS-1269 were developed.

Введение. Разработка инновационных отечественных противоопухолевых средств остается крайне важной задачей. Среди новых избирательно действующих на опухоли лекарственных веществ значительный интерес представляют N-гликозиды индоло[2,3-a]карбазола ЛХС-1208 и ЛХС-1269, синтезированные по оригинальной методике в Национальном медицинском исследовательском центре онкологии им. Н. Н. Блохина В работе представлены возможности использования инструментальных методов анализа для выявления отличий в физико-химических свойствах близких по структуре соединений ЛХС-1208 и ЛХС-1269 и установления экспериментально обоснованных норм качества для их стандартизации как фармацевтических субстанций.

Цель исследования – изучение физико-химических свойств и разработка методов качественного и количественного анализа ЛХС-1208 и ЛХС-1269.

Материалы и методы. В работе использованы современные инструментальные методы анализа: поляриметрия, спектрофотометрия (ультрафиолетовая спектрофотометрия), инфракрасная спектроскопия, спектроскопия протонного магнитного резонанса, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и ВЭЖХ с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС / МС).

Результаты. С помощью современных инструментальных методов выявлены достоверные различия в физико-химических свойствах N-гликозидов индоло[2,3-a]карбазола ЛХС-1208 и ЛХС-1269. Представлены результаты, подтверждающие структуру каждого соединения, и разработаны методики для их качественного и количественного анализа. Проведена валидация ВЭЖХ-методики количественного определения ЛХС-1269, которая показала соответствие полученных валидационных характеристик критериям Государственной фармакопеи Российской Федерации XV издания и Фармакопеи Евразийского экономического союза. Установлено строение примесей в ЛХС-1269 и предложена методика их количественного определения.

Заключение. Подтверждена структура производных индоло[2,3-a]карбазола ЛХС-1208 и ЛХС-1269 и показано, что можно достоверно отличить их друг от друга. Установлены структуры примесей, образующихся на последнем этапе синтеза ЛХС-1269. Разработаны ВЭЖХ-методики количественного определения ЛХС-1208 и ЛХС-1269.

indolo[23-a]carbazole N-glycosidesinstrumental methods of analysisrelated impuritiesqualitative and quantitative analysisstandardizationN-гликозиды индоло[23-a]карбазолаинструментальные методы анализародственные примесикачественный и количественный анализстандартизацияМинистерство здравоохранения Российской ФедерацииMinistry of Health of the Russian Federation056-00065-23 ПРThe study was conducted within the framework of the state assignment on the topic “Preclinical and pharmaceutical development of an original domestic antitumor drug topoisomerase I inhibitor for the purpose of conducting clinical trials (priority studies)”, No. 123021500024-4, 2023–2025.Исследование проведено в рамках государственного задания по теме «Доклиническая и фармацевтическая разработка отечественного противоопухолевого лекарственного средства ингибитора топоизомеразы I с целью проведения клинических исследований (приоритетные исследования)», № 123021500024-4, 2023–2025 гг.Трякин А.А., Бесова Н.С., Волков Н.М. и др. Общие принципы проведения противоопухолевой лекарственной терапии. Практические рекомендации RUSSCO, часть 1. Злокачественные опухоли 2023;13:28–41. DOI: 10.18027/2224-5057-2023-13-3s2-1-28-41 Tryakin A.A., Besova N.S., Volkov N.M. et al. General principles of antitumor drug therapy. Practical recommendations RUSSCO, part 1. Malignant tumors 2023;13:28–41. (In Russ.). DOI: 10.18027/2224-5057-2023-13-3s2-1-28-41Зенков Р.Г., Эктова Л.В., Власова О.А. и др. Индоло[2,3-a]карбазолы: разнообразие, биологические свойства. Химия гетероциклических соединений 2020;56(6):644–58. Zenkov R.G., Ektova L.V., Vlasova O.A. et al. Chem. Indolo[2,3-a]carbazoles: diversity and biological properties. Chem Heterocycl Compd 2020;56(6):644–58. (In Russ.).Janosik T., Rannug A., Rannug U. et al. Chemistry and properties of indolocarbazoles. Chem Rev 2018;118(18):9058–128. DOI: 10.1021/acs.chemrev.8b00186.Wang J., Jin W., Zhou X. et al. Identification, structure-activity relationships of marine-derived indolocarbazoles, and a dual PKCθ/δ inhibitor with potent antipancreatic cancer efficacy. J Med Chem 2020;63(21):12978–91. DOI: 10.1021/acs.jmedchem.0c01271Киселева М.П., Покровский В.С., Татарский В.В. и др. Производные индолокарбазолов – перспективный класс противоопухолевых препаратов. Российский биотерапевтический журнал 2018;17(4):20–6. DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-4-20-26 Kiseleva M.P., Pokrovsky V.S., Tatarskiy V.V. et al. Indolocarbazole derivatives – a promising class of anticancer drugs. Rossijskij bioterapevticeskij zurnal = Russian Journal of Biotherapy 2018;17(4):20–6. (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-4-20-26Эктова Л.В., Еремина В.А., Тихонова Н.И. и др. Синтез и цитотоксическая активность N-гликозидов индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c]карбазол-5,7-дионов, замещенных по малеимидному атому азота. Химико-фармацевтический журнал 2020;54(5):26–9. DOI: 10.30906/0023-1134-2020-54-5-26-29 Ektova L.V., Eremina V.A., Tikhonova N.I. еt al. Synthesis and cytotoxicity of N-glycosides of indolo[2,3-а]pyrrolo[3,4-c] carbazolo-5,7-diones substituted at the maleimide nitrogen atom. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal = Chemical and Pharmaceutical Journal 2020;54(5):26–9. (In Russ.). DOI: 10.30906/0023-1134-2020-54-5-26-29Борисова Л.М., Голубева И.С., Горюнова О.В. и др. N-гликозиды индоло[2,3-a]пирроло[3,4-c] кабазолов, обладающие противоопухоливой активностью. Патент РФ №2548045 C1, 10.04.2015. Бюл. №10. Borisova L.M., Golubeva I.S., Goryunova O.V. et al. N-glycosides of indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazoles with antitumor activity. RU2548045 C1, 10.04.2015. Byll. No. 10. (In Russ.).Голубева И.С., Еремина В.А., Моисеева Н.И. и др. Производное класса N-гликозидов индоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-5,7-дионов – N-{2-(β-d-ксило-пиранозил)-5,7-диоксоиндоло[2,3-а]пирроло[3,4-с]карбазол-6-ил}пиридин-2-карбоксамид, обладающее цитотоксической и противоопухолевой активностью. Патент РФ №2667906 C1, 25.09.2018. Бюл. №27. Golubeva I.S., Eremina V.A., Moiseeva N.I. et al. A derivative of N-glycosides of indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-5,7-diones – N-{2-(β-d-xylo-pyranosyl)-5,7-dioxoindolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]carbazole-6-yl}pyridine-2-carboxamide, exhibiting cytotoxic and antitumor activity. RU2667906 C1, 25.09.2018. Byll. No. 27. (In Russ.).Zenkov R.G., Vlasova O.A., Maksimova V.P. et al. Molecular mechanisms of anticancer activity of N-glycosides of indolocarbazoles LCS-1208 and LCS-1269. Molecules 2021;26(23):7329. DOI: 10.3390/molecules26237329Shprakh Z. Formulation of somatostatin analog tablets using quality by design approach. J Appl Pharm Sci 2021;11(04):96–105. DOI: 10.7324/JAPS.2021.110412Козин Д.А., Шпрах З.С., Решетняк В.Ю. и др. Производные индоло[2,3-а]карбазола, обладающие противоопухолевой активностью, и инструментальные методы их исследования (обзор). Разработка и регистрация лекарственных средств 2020;9(4):128–35. DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-4-128-135 Kozin D.A., Shprakh Z.S., Reshetnyak V.Yu. et al. Indolo[2,3-a]carbazole derivatives with antitumor activity and instrumental methods for their investigation (review). Razrabotka i registratsiya lekarstvennyh sredstv = Drug Development & Registration 2020;9(4):128–35. (In Russ.). DOI: 10.33380/2305-2066-2020-9-4-128-135Моисеев С.В., Кузьмина Н.Е., Лутцева А.И. Метод ЯМР в отечественной и зарубежных фармакопеях для оценки качества лекарственных средств. Ведомости научного центра экспертизы средств медицинского применения. Регуляторные исследования и экспертиза лекарственных средств 2022;12(1):8–23. DOI: 10.30895/1991-2919-2022-12-1-8-23 Moiseev S.V., Kuz’mina N.E., Luttseva A.I. NMR as used in the Russian and foreign pharmacopoeias for quality control of medicinal products. Vedomosti nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsinskogo primeneniia. Reguliatornye issledovaniia i ekspertiza lekarstvennykh sredstv = Bulletin of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products. Regulatory Research and Medicine Evaluation 2022;12(1):8–23. (In Russ.). DOI: 10.30895/1991-2919-2022-12-1-8-23Cui T, Lin S, Wang Z. et al. Cytotoxic Indolocarbazoles from a marine derived Streptomyces sp. OUCMDZ-5380. Front Microbiol 2022;13:957473. DOI: 10.3389/fmicb.2022.957473Игнатьева Е.В., Ярцева И.В., Шпрах З.С. и др. Стандартизация фармацевтической субстанции препарата ЛХС-1208. Разработка и регистрация лекарственных средств 2021;10(3):88–94. DOI: 10.33380/2305-2066-2021-10-3-88-94 Ignatieva E.V., Yartseva I.V., Shprakh Z.S. et al. Standardization of the pharmaceutical substance of the drug LСS-1208. Razrabotka y registratsiya lekarstvennykh sredstv = Development and Registration of Medicines 2021;10(3):88–9. (In Russ.). DOI: 10.33380/2305-2066-2021-10-3-88-94Игнатьева Е.В., Ярцева И.В., Шпрах З.С. и др. Количественное определение N-гликозидного производного замещенного индоло[2,3а]карбазола в инновационных лекарственных формах. Российский биотерапевтический журнал 2022;21(3):61–71. DOI: 10.17650/1726-9784-2022-21-3-61-71 Ignatieva E.V., Yartseva I.V., Shprah Z.S. et al. Quantitative determination of the N-glycoside derivative of substituted indolo[2,3a]carbazole in innovative dosage forms. Rossijskij bioterapevticeskij zurnal = Russian Journal of Biotherapy 2022;21(3):61–71. (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784-2022-21-3-61-71Ланцова А.В., Санарова Е.В., Оборотова Н.А и др. Разработка технологии получения инъекционной лекарственной формы на основе отечественной субстанции производной индолокарбазола ЛХС-1208. Российский биотерапевтический журнал 2014;13(3):25–32. DOI: 10.17650/1726-9784-2014-13-3-25-32 Lantsova A.V., Sanarova E.V., Oborotova N.A. et al. Development of technology for obtaining an injectable dosage form based on the original substance indolocarbazole derivative LСS-1208. Rossijskij bioterapevticeskij zurnal = Russian Journal of Biotherapy 2014;13(3):25–32. (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784-2014-13-3-25-32Шпрах З.С., Игнатьева Е.В., Козин Д.А. Сравнительный анализ методов количественного определения производного индолокарбазола ЛХС-1269 в лекарственной форме. Химико-фармацевтический журнал 2024;58(12):45–9. DOI: 10.30906/0023-1134-2024-58-12-45-49 Shprakh Z.S., Ignatieva E.V., Kozin D.A. Comparative analysis of methods for the quantitative determination of indolocapbazole derivative LHS-1269 in dosage form. Khimiko-farmatsevticheskiy zhurnal = Chemical and Pharmaceutical Journal 2024;58(12):45–9. (In Russ.). DOI: 10.30906/0023-1134-2024-58-12-45-49Снайдер Л.Р. Введение в современную жидкостную хроматографию. В кн.: Снайдер Л.Р., Киркленд Дж.Дж., Долан Д.У. М.: Техносфера, 2020. 960 с. Snyder L.R. Introduction to modern liquid chromatography. Snyder L.R., Kirkland J.J., Dolan D.W. Moscow: Tekhnosfera, 2020. 960 р. (In Russ.).Козин Д.А., Шпрах З.С., Будько А.П. и др. Идентификация примесей в фармацевтической субстанции методом ВЭЖХ-МСМС. Медико-фармацевтический журнал «Пульс» 2023;25(1):78–82. DOI: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-1-78-82 Kozin D.A., Shprakh Z.S., Budko A.P. et al. Identification of impurities in pharmaceutical substances by HPLC-MSMS. Medical Pharmaceutical Journal “Pulse” 2023;25(1):78–82. (In Russ.). DOI: 10.26787/nydha-2686-6838-2023-25-1-78-82