Background. Inactivating mutations in Chek2 and Gprc5a genes are known to be associated with cancer development. Experimental carcinogenesis studies in genetically modified mice generate new data on their influence on pathology development.
Aim. In the present study in a model of lung carcinogenesis, survival parameters as well as tumor multiplicity and size in mice with Chek2 and Gprc5a heterozygous inactivating mutations were evaluated.
Material and methods. F2 hybrid mice from crosses between CBAB6F1 males heterozygous for the studied mutations and wild-type BALB / c females were used: Chek2dAA-carriers (76 males and 64 females) and Gprc5ainsA-carriers (60 males and 42 females). Starting at four months of age, mice received urethane (ethyl carbamate) intraperitoneally at a dose of 600 mg / kg weekly for 6 weeks. After genotyping by allele-specific PCR, animals were allocated to groups. Carcinogenesis parameters were evaluated 40 weeks after the beginning of the experiment.
Results. The proportion of mice with mutations surviving to the age of three months roughly followed the Mendelian distribution (35 / 41 males and 33 / 31 females) for the offspring of males heterozygous for Chek2dAA and was significantly lower in the case of Gprc5ainsA (20 / 40 males and 17 / 25 females, p = 0.043). The death of Gprc5ainsA carriers during the experiment was also higher than in the control group (p = 0.0506 in females). Synchronous lung and thymus neoplasms were found in 2 out of 4 Gprc5ainsA females that died before the end of the experiment, which were not found in other groups. At the end of the experiment, no significant differences in tumor multiplicity, mean linear size, and volume were found between the groups of mice with and without mutations.
Conclusion. It was found that heterozygous inactivating mutation Chek2dAA does not affect early age development and does not modify the parameters of induced lung carcinogenesis in mice. Heterozygous carriage of Gprc5ainsA mutation in mice increases the risk of early death and sensitivity to the toxic and carcinogenic effects of urethane.
Введение. Известно, что инактивирующие мутации в генах Chek2 и Gprc5a ассоциированы с развитием онкологических заболеваний. Экспериментальные исследования канцерогенеза у генетически модифицированных мышей позволяют получить новые данные об их влиянии на развитие патологии.
Цель исследования – на мышах с гетерозиготными инактивирующими мутациями в генах Chek2 и Gprc5a оценить выживаемость, а также множественность и размеры экспериментальных опухолей в модели канцерогенеза легкого.
Материалы и методы. Использовали мышей гибридов 2-го поколения от скрещивания гетерозиготных по исследуемым мутациям самцов CBAB6F1 с самками BALB / c дикого типа: потомков носителей мутаций Chek2dAA (76 самцов и 64 самки) и Gprc5ainsA (60 самцов и 42 самки). Начиная с 4-месячного возраста мыши получали уретан (этилкарбамат) внутрибрюшинно в дозе 600 мг / кг еженедельно в течение 6 нед. После генотипирования с помощью аллель-специфической полимеразной цепной реакции животных распределяли по группам. Через 40 нед от начала опыта проводили оценку параметров канцерогенеза.
Результаты. Доля доживших до 3-месячного возраста мышей с мутациями примерно соответствовала менделевскому распределению (35 / 41 самцы и 33 / 31 самки) для потомства самцов, гетерозиготных по Chek2dAA и была существенно меньше в случае Gprc5ainsA (20 / 40 самцы и 17 / 25 самки; p = 0,043). Гибель носителей Gprc5ainsA в течение опыта также была выше, чем у контрольной группы (p = 0,0506 у самок). У 2 из 4 погибших до окончания опыта самок Gprc5ainsA обнаружены синхронные новообразования легких и тимуса, не встречавшиеся в других группах. В конце эксперимента не выявлено существенных различий между значениями показателей множественности, средних линейных размеров и объемов опухолей в группах мышей с мутациями и без них.
Заключение. Установлено, что гетерозиготная инактивирующая мутация Chek2dAA у мышей не влияет на развитие животных раннего возраста и не модифицирует параметры индуцированного канцерогенеза легкого. Гетерозиготное носительство мутации Gprc5ainsA у мышей повышает риск ранней гибели и чувствительность к токсическому и канцерогенному воздействию уретана.