Russian Journal of BiotherapyRussian Journal of BiotherapyРоссийский биотерапевтический журнал1726-97841726-9792Publishing House ABV Press123310.17650/1726-9784-2020-19-4-54-64ORIGINAL REPORTSОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИSUBPOPULATION STRUCTURE OF PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES OF DONORSСУБПОПУЛЯЦИОННАЯ СТРУКТУРА ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ДОНОРОВhttps://orcid.org/0000-0002-1854-3455BorunovaA. A.БоруноваА. А.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

Анна Анатольевна Борунова 

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

Borunova-a@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7631-5699ZabotinaT. N.ЗаботинаТ. Н.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0003-3937-474XShouaE. K.ШоуаЭ. К.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0002-1416-0545ChkaduaG. Z.ЧкадуаГ. З.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0001-9146-5986ChertkovaA. I.ЧертковаА. И.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0002-1509-2206TabakovD. V.ТабаковД. В.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0003-2790-6673ZakharovaE. N.ЗахароваЕ. Н.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0003-0644-4537OgorodnikovaE. V.ОгородниковаЕ. В.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

https://orcid.org/0000-0002-0058-0987KadagidzeZ. G.КадагидзеЗ. Г.
Russian Federation

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478

115478 Москва, Каширское шоссе, 24

N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian FederationФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России0912202019454640812202008122020https://bioterapevt.abvpress.ru/jour/article/view/1233

Introduction. Long-term monitoring of immune system parameters in cancer patient in FSBI “N.N. Blokhin Medical Research Center of Oncology” of the Ministry of Health of Russia, as well as the absence of an immunological research algorithm and a spectrum of significant markers, served as the basis for this study.

Purpose. To present reference values and determine the normal range for subpopulations of systemic immunity lymphocytes.

Materials and methods. The phenotype of peripheral blood lymphocytes was studied in 186 healthy donors (86 men and 100 women), mean age 41,9 ± 12,5 years. To assess the multivariate phenotype by flow cytometry, monoclonal antibodies to CD45, CD3, CD4, CD8, CD16, CD56, CD19, CD25, CD28, CD11b, CD127, HLA-Dr, TCR-γ / δ, Perforin and Granzime B labeled various fluorochromes.

Results. A panel of markers of immunocompetent cells of systemic immunity was developed as a basis for assessing the state of the immune system of cancer patients. Reference values and normal boundaries are given for characterizing the linearity of cells with detailing of the phenotypic and functional heterogeneity of the population of CD8+-lymphocytes, activation markers and the pool of naive cells; characteristics of various types of regulatory cells, functional activity of cells of the effector link of immunity. A comparative analysis of immunoregulatory indices was carried out and the vulnerability of the formula CD3+CD4+/CD3+CD8+ to the CD4+/CD8+ index was proved.

Conclusion. The spectrum of the proposed indicators is the product of many years of research carried out in the laboratory of clinical immunology of the Federal State Budgetary Institution “N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology” оf the Ministry of Health of the Russian Federation, in order to search for significant criteria for assessing the state of the immune system in cancer.

Введение. Длительный мониторинг показателей иммунной системы у онкологических больных в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, а также отсутствие алгоритма иммунологического исследования и спектра значимых маркеров послужили основой проведения данного исследования.

Цель исследования – представить референсные значения и определить границы нормы для субпопуляций лимфоцитов системного иммунитета.

Материалы и методы. Исследован фенотип лимфоцитов периферической крови 186 здоровых доноров (86 мужчин и 100 женщин), средний возраст 41,9 ± 12,5 года. Для оценки многопараметрового фенотипа методом проточной цитометрии применяли моноклональные антитела к CD45, CD3, CD4, CD8, CD16, CD56, CD19, CD25, CD28, CD11b, CD127, HLA-Dr, TCR-γ / δ, Perforin и Granzime B, меченные различными флуорохромами.

Результаты. Разработана панель маркеров иммунокомпетентных клеток системного иммунитета как основа оценки состояния иммунной системы онкологических больных. Даны референсные значения и границы нормы для характеристики линейной принадлежности клеток с детализацией фенотипической и функциональной неоднородности популяции CD8+-лимфоцитов, маркеров активации и пула наивных клеток; характеристики различных типов регуляторных клеток, функциональной активности клеток эффекторного звена иммунитета. Проведен сравнительный анализ иммунорегуляторных индексов и доказана уязвимость формулы CD3+CD4+/CD3+CD8+ перед CD4+/CD8+ индексом.

Заключение. Спектр предложенных показателей является продуктом многолетних исследований, проводимых в лаборатории клинической иммунологии НИИ КО им. Н.Н. Трапезникова ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России с целью поиска значимых критериев для оценки состояния иммунной системы при онкологических заболеваниях.

Т-regulatory cellseffector lymphocytessystemic immunitylimits of the normТ-регуляторные клеткиэффекторные лимфоцитысистемный иммунитетграницы нормыThe study was performed with the financial support of the Ministry of Health of Russia in the framework of research № АААА-А19-119022090028-6.Исследование проведено при финансовой поддержке Минздрава России в рамках темы НИР № АААА-А19-119022090028-6.Toptygina A.P., Semikina E.L., Petrichuk S.V. et al. Age-dependent changes of T-regulatory and Th17 subset levels in peripheral blood from healthy humans. Meditsinskaya Immunologiya = Medical Immunology 2017;19(4): 409–20. (In Russ.).Топтыгина А.П., Семикина Е.Л., Петричук С.В. и др. Изменение уровня субпопуляций Т-регуляторных клеток и Т-хелперов 17 в периферической крови здоровых людей в зависимости от возраста. Медицинская иммунология 2017;19(4):409–20. DOI: 10.15789/1563-0625-2017-4-409-420.Kudryavtsev I.V., Borisov A.G., Vasilyeva E.V. et al. Phenotypic characterisation of peripheral blood cytotoxic T lymphocytes: regulatory and effectormolecules. Meditsinskaya Immunologiya = Medical Immunology 2018;20(2):227–40. (In Russ.).Кудрявцев И.В., Борисов А.Г., Васильева Е.В. и др. Фенотипическая характеристика цитотоксических Т-лимфоцитов: регуляторные и эффекторные молекулы. Медицинская иммунология 2018;20(2):227–40. DOI: 10.15789/1563-0625-2018-2-227-240.Selimova L.M., Serebrovskaya L.V., Kalnina L.B. et al. The indicators of immune status of peripheral blood of donors. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian clinical laboratory diagnostics 2014;6:40–3. (In Russ.).Селимова Л.М., Серебровская Л.В., Калнина Л.Б. и др. Показатели иммунного статуса периферической крови доноров. Клиническая лабораторная диагностика 2014;6:40–3.Savlevich Е.L., Khaidukov S.V., Kurbacheva O.M. et al. Characteristics of cellular immune status in the patients with chronic rhinosinusitis with nasal polyps. Meditsinskaya Immunologiya = Medical Immunology 2017;19(6):731–8. (In Russ.).Савлевич Е.Л., Хайдуков С.В., Курбачева О.М. и др. Показатели клеточного иммунитета пациентов с хроническим полипозным риносинуситом. Медицинская иммунология 2017;19(6):731–8. DOI: 10.15789/1563-0625-2017-6-731-738.Vetlugina T.P., Lobacheva O.A., Alperina E.L. et al. Clinical and experimental research of immunomodulatory effect of amisulpride. Vestnik RAMN = Annals of the RAMS 2012;12:13–7. (In Russ.).Ветлугина Т.П., Лобачева О.А., Альперина Е.Л. и др. Клинико-экспериментальные исследования иммуномодулирующего эффекта амисульприда. Вестник РАМН 2012;12:13–7.Yi J.S., Rosa-Bray M., Staats J. et al. Establishment of normative ranges of the healthy human immune system with comprehensive polychromatic flow cytometry profiling. PLoS ONE 2019;14(12):1–18. DOI.org/10.1371/journal.pone.0225512.Kokuina E., Breff-Fonseca M.C., Villegas-Valverde C.A., Mora-Díaz I. Normal Values of T, B and NK Lymphocyte Subpopulations in Peripheral Blood of Healthy Cuban Adults. MEDICC Review 2019; 21(2–3):16–21. PMID: 31373580.Pashina N.A., Romanova Yu.V., Polovodova N.S. Immune status of native and alien population in yamal-nenets autonomous area. Ekologiya cheloveka = Human ecology 2007;8:19–23. (In Russ.).Пашина Н.А., Романова Ю.В., Половодова Н.С. Иммунный статус коренного и пришлого населения ямало-ненецкого автономного округа. Экология человека 2007;8:19–23.Evseeva I.V. Indicator of two radical ethnic group immune status in the far north. Ekologiya cheloveka = Human ecology 2010;10:37–41.(In Russ.).Евсеева И.В. Показатели иммунного статуса в двух коренных этнических группах севера. Экология человека 2010;10:37–41.Soburov K.A. Peculiarities of immune reactivity of permanent residents of mountain regions. Ulyanovskiy mediko-biologicheskiy zhurnal = Ulyanovsk medical and biological journal 2011;4:69–76e. (In Russ.).Собуров К.А. Особенности иммунной реактивности у постоянных жителей горных регионов. Ульяновский медико-биологический журнал 2011;4: 69–76e.Zhang K., Wang F., Zhang M. et al. Reference Ranges of Lymphocyte Subsets Balanced for Age and Gender from a Population of Healthy Adults in Chongqing District of China. Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 2016;90B:538–42. DOI: 10.1002/cyto.b.21323.Mannanova I.V., Khоkhlova O.N., Ponezheva Zh.B. Clinical-immunological features of chronic hepatitis type C depending on the degree of liver fibrosis. Prakticheskaya Meditsina = Practical Medicine 2018;16(9):180–2. DOI: 10.32000/2072-1757-2018-9-180-182. (In Russ.).Маннанова И.В., Хохлова О.Н, Понежева Ж.Б. Клинико-иммунологические особенности хронического гепатита С в зависимости от степени фиброза печени. Практическая медицина 2018;16(9):180–2. DOI: 10.32000/2072-1757-2018-9-180-182.Saakyan S.V., Balatskaya N.V., Katargina L.A. et al. Subpopulation profile of peripheral blood lymphocytes in uveal melanoma. Meditsinskaya Immunologiya = Medical Immunology 2019;21(4):765–72. (In Russ.).Саакян С.В., Балацкая Н.В., Катаргина Л.А. и др. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови при увеальной меланоме. Медицинская иммунология 2019;21(4):765–72. DOI: 10.15789/1563-0625-2019-4-765-772.Zabotina T.N., Chertkova A.I., Korotkova O.V. et al. The relationship between immune parameters and age and expression of hormone receptors in patients with primary operable breast cancer. Onkoginekologiya = Gynecologic Oncology 2018;4(28):21–30. (In Russ.).Заботина Т.Н., Черткова А.И., Короткова О.В. и др. Связь основных показателей иммунитета с возрастом и экспрессией гормональных рецепторов у больных первично операбельным раком молочной железы. Онкогинекология 2018;4(28):21–30.Dai S.X, Zhang Q.F., Zheng Z.W. et al. Decreased CD8+CD28+/CD8+CD28 T cell ratio can sensitively predict poor outcome for patients with complicated Crohn disease. Medicine (Baltimore) 2017;96(26):е7247. DOI: 10.1097/md.0000000000007247.Song Q., Ren J., Zhou X. et al. Circulating CD8+CD28 suppressor T cells tied to poorer prognosis among metastatic breast cancer patients receiving adoptive T-cell therapy: A cohort study. Clinical Immunotherapy 2018;20(1):126–33. PMID: 28988693. DOI: 10.1016/j.jcyt.2017.08.018.Fiorentini S., Licenziati S., Alessandri G. et al. CD11b Expression Identifies CD8+CD28+ T Lymphocytes with Phenotype and Function of Both Naive/ Memory and Effector Cells1. The Journal of Immunology 2001;166(2):900–7. DOI: https://doi.org/10.4049/jimmunol.166.2.900.Duftner C., Dejaco C., Hengster P. et al. Apoptotic Effects of Antilymphocyte Globulins on Human Pro-inflammatory CD4+CD28– T-cells. PLoS ONE 2012;7(3):1–10. DOI: 10.1371/journal.pone.0033939.Yadav A.K. and Jha V. CD4+CD28null cells are expanded and exhibit a cytolytic profile in end-stage renal disease patients on peritoneal dialysis. Nephrol Dial Transplant 2011;26:1689–94. DOI: 10.1093/ndt/gfr010.Emoto T., Sasaki Na., Yamashita T. et al. Regulatory/Effector T-Cell Ratio Is Reduced in Coronary Artery Disease Regulatory/Effector T-Cell Ratio Is Reduced in Coronary Artery Disease. Circ J 2014;78:2935–41. DOI: 10.1253/circj.CJ-14-0644.Tabakov D.V., Zabotina T.N., Zakharova E.N. et al. The subpopulation balance of effector cells in the peripheral blood of cancer patients. Immunologiya = Immunology 2019;40(3):20–7. (In Russ.).Табаков Д.В., Заботина Т.Н., Захарова Е.Н. и др. Субпопуляционный баланс эффекторных клеток периферической крови онкологических больных. Иммунология 2019;40(3): 20–7. DOI: 10.24411/0206-4952-2019-13003.Chertkova A.I., Slavina E.G., Shoua E.K. et al. The main parameters of cellular immunity in patients with triple-negative breast cancer. Relationship with efficiency of chemotherapy. Meditsinskaya Immunologiya = Medical Immunology 2018;20(5):667–80. (In Russ.).Черткова А.И., Славина Е.Г., Шоуа Э.К. и др. Основные параметры клеточного иммунитета у больных раком молочной железы с тройным негативным фенотипом. Связь с эффективностью химиотерапии. Медицинская иммунология 2018;20(5): 667–80. DOI: 10.15789/1563-0625-2018-5-667-680.Qin L., Jing X., Qiu Z. et al. Aging of immune system: Immune signature from peripheral blood lymphocyte subsets in 1068 healthy adults. AGING 2016;8(5):848–59. DOI: 10.18632/aging.100894.